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農桿菌菌株及其侵染濃度和時間對基于菜豆黃矮病毒表達載體瞬時表達外源基因的影響

李穎  張悅婧  王馨  龐海龍  賈凌云  馮漢青  
【摘要】:以3種常見的農桿菌菌株(GV3101、EHA105、LBA4404)和基于菜豆黃矮病毒的復制型植物表達載體為材料,利用農桿菌介導的瞬時轉化技術,將外源綠色熒光蛋白(GFP)基因導入本氏煙(Nicotiana benthamiana L.)葉片中實現瞬時表達,并對不同農桿菌菌株、侵染濃度及侵染時間對于瞬時表達水平的影響進行比較。結果顯示,3種不同的農桿菌菌株在介導轉化本氏煙葉片瞬時表達GFP積累水平之間存在顯著差異,其中EHA105菌株轉化效率最高,LBA4404次之,GV3101最低。此外,GV3101、EHA105和LBA4404最適侵染濃度的OD600值分別為0. 5、0. 3和0. 3;最佳侵染時間均為第4 d。研究結果表明農桿菌菌株染色體結構和Ti質粒的差異是影響瞬時轉化過程中農桿菌侵染濃度及其外源基因瞬時表達效率的重要因素。
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